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色譜耗材常見問題(六)

 1、色譜柱的溫度極限,如60℃至240℃/260℃各表示什么?60℃—溫度下限,低于該溫度使用柱效會降低,但不會損傷色譜柱;240℃—恒溫溫度上限,可在此溫度長時間使用;260℃—程序升溫溫度上限,不可超過此溫度,且在此溫度使用不得超過10分鐘。

2、了解有關液相色譜柱的幾個參數及安捷倫色譜柱的分類和應用范圍表面積——顆粒外表面和內部孔表面的總和,以m2/gram表示;高表面積對于多組份樣品的分離具有較強的保留能力,柱容量和分離度;表面積低的填料通常能迅速達到平衡狀態,對于梯度淋洗尤為重要。孔徑——顆粒的孔或腔的平均尺寸,范圍60-10,000Å,大孔的填料顆粒可以延長溶質大分子在填料表面滯留的時間,達到充分分離,改善峰形;樣品MW≤4000,選擇80Å的孔徑,樣品MW>4000選擇300Å的孔徑。碳覆蓋率——對色譜分離的影響,與基體物質相連的鍵合相的量。高碳覆蓋率:提高分辨率,分析時間長;低碳覆蓋率:縮短運行時間封端/封尾——對色譜分離的影響,使用較短烷烴鏈鍵合游離硅羥基(二次鍵合)封端:減輕待測組份與硅膠表面殘留的酸性硅羥基反應而引起的色譜峰拖尾現象對于極性樣品,未封端與經過封端處理的色譜柱在選擇性上有明顯差異粒徑——1.8um3.5um→快速分離;5um→行業標準;7um→制備柱。